Contenu :
La galerie biochimique API est un système de tests couramment utilisé en microbiologie pour faciliter l'identification des bactéries.
◉ Introduction
Galerie API (analytical profile index) est une galerie miniaturisée et standardisée de tests biochimiques, exploitable avec des bases de données d 'identification complètes dont la plus connue est l'api 20E (20 caractères pour les entérobactéries)
Selon BIOMERIEUX 10 galeries API® sont utilisées chaque minute dans le monde, elles sont également utilisées pour évaluer les performances des autres produits d'identification.
L'identification initiale des bactéries via des méthodes telles que la coloration de Gram ou des milieux de culture sélectifs ou différentiels est essentielle avant de choisir la galerie API appropriée.
Des systèmes similaires sont proposés par d'autres entreprises, comme le Liofilchem EnteroPluri-Test.
◉ Galerie d'identification API 20E
L'API 20E comprend une bande en plastique contenant 20 mini-puits de test. Chaque puits contient des milieux déshydratés avec des compositions chimiquement définies pour détecter généralement l'activité enzymatique, principalement liée à la fermentation des glucides ou au catabolisme des protéines et des acides aminés par les organismes inoculés.
☰ Les differents tests dans l'API 20E :
1- ONPG : test de l'enzyme β-galactosidase par hydrolyse du substrat o-nitrophényl-bD-galactopyranoside
2- ADH: décarboxylation de l'acide aminé arginine par l'arginine dihydrolase
3- LDC: décarboxylations de l'acide aminé lysine par la lysine décarboxylase
4- ODC: décarboxylations de l'acide aminé ornithine par l'ornithine décarboxylase
5- CIT: utilisation du citrate comme seule source de carbone
6- H2S: production de sulfure d'hydrogène
7- URE: test de l'enzyme uréase
8- TDA (Tryptophane désaminase): détection de l'enzyme tryptophane désaminase: réactif à mettre - Chlorure ferrique.
9- IND: Test Indole - production d'indole à partir de tryptophane par l'enzyme tryptophanase. Réactif - L'indole est détecté par l'ajout du réactif de Kovac.
10- VP : le test de Voges-Proskauer pour la détection de l'acétoïne (acétylméthylcarbinol) produite par fermentation du glucose par des bactéries utilisant la voie du butylène glycol
11- GEL: test de production de l'enzyme gélatinase qui liquéfie la gélatine
12- GLU: fermentation du glucose (sucre hexose)
13- MAN: fermentation du mannose (sucre hexose)
14- INO: fermentation de l'inositol (polyalcool cyclique)
15- SOR: fermentation du sorbitol (sucre d'alcool)
16- RHA: fermentation du rhamnose (sucre de méthyl pentose)
17- SAC: fermentation du saccharose (disaccharide)
18- MEL: fermentation du mélibiose (disaccharide)
19- AMY: fermentation de l'amygdaline (glycoside)
20- ARA: fermentation de l'arabinose (sucre pentose)
Une suspension bactérienne est employée pour réhydrater chaque puits, et les bandelettes sont ensuite incubées. Au cours de cette incubation, les activités métaboliques des bactéries provoquent des modifications de couleur, qui se manifestent de manière spontanée ou sont révélées par l'addition de réactifs.
◉ Préparation de la galerie
- Prenez une seule colonie isolée (à partir d'une culture pure) et faites une suspension bactérienne dans de l'eau distillée stérile (0,5 McFarland).
- Réunir fond et couvercle d 'une boîte d 'incubation et répartir de l 'eau dans les alvéoles pour créer une atmosphère humide.Puis déposer stérilement la galerie dans la boîte d 'incubation
- Marquez le plateau avec le numéro d'identification (ID du patient ou ID de l'organisme), la date et vos initiales.
- Incubez le plateau à 37 o C pendant 18 à 24 heures.
- Après incubation ajouter les réactifs comme suit :
Prenez une pipette pasteur et remplissez ces compartiments avec la suspension bactérienne comme suite (photo) :
| Puits | Réactif |
|---|---|
| TDA | Une goutte de réactif TDA |
| IND | Une goutte de réactif de James ou kovacs |
| VP | Une goutte de réactif de VP1 puis VP2 |
◉ Lecture de la galerie API 20E
La lecture de ces réactions ( positives ou négatives ) se fait en fonction des variations des couleurs.
API 20E positive vs negative
- Vous pouvez utiliser un outil en ligne gratuit pour interpréter votre test API, tel que le site UPBM (notez que la base de données peut ne pas être à jour).
- Vous pouvez également saisir vos résultats dans la feuille de calcul Excel téléchargeable
- Une autre option est d'utiliser apiwebTM biomerieux
◉ Fiches techniques et Protocoles des galeries API
Nous avons collecté les principaux manuels pour réaliser votre API d'identification biochimique (API 20e ,API NE , API STREPT ,API STAPH , API CANDIDA...) :
| Galeries | Protocoles |
|---|---|
| API 20E pdf | Télécharger |
| API NE pdf | Télécharger |
| API STREPT pdf | Télécharger |
| API STAPH pdf | Télécharger |
| API LISTERIA pdf | Télécharger |
| API CANDIDA pdf | Télécharger |
| API CH50 pdf | Télécharger |
| API A pdf | Télécharger |
| API 20C pdf | Télécharger |
API 20E positive vs negative
API 20NE positive vs negative
API Strep positive vs negative
API NH positive vs negative
API Staph positive vs negative
-Vous pouvez avoir tout les informations nécessaire a la manipulation et l'intérprètation des API 20e ,API NE , API STREPT ,API STAPH , API CANDIDA... dans le fichier suivant Télécharger