Gélose au citrate de Simmons
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Ⅰ. Introduction
La gélose citrate de Simmons est un milieu de culture pour la différenciation des bactéries gram-négatives sur la base de l'utilisation du citrate. Le milieu teste la capacité des organismes à utiliser le citrate comme la seule source de carbone
La gélose citrate de Simmons est une forme solidifiée du milieu au citrate de Koser qui souffrait de l'inconvénient qu'une fausse apparence de croissance se produisait lorsqu'on employait de gros inoculums. Simmons a modifié la formulation de Koser en ajoutant de l'agar et du bleu de bromothymol
Ce milieu fait partie des tests IMViC et est utile pour différencier les Enterobacteriaceae.
Gélose citrate de Simmons
Ⅱ. Composition citrate de Simmons
Suspendre les composants, poudre déshydratée, dans l'eau (23.3 grammes dans 1000 ml d'eau purifiée/distillée). Le milieu est bouilli pendant quelques secondes jusqu'à dissolution complète des ingrédients. Répartir dans des tubes ou flacons et stériliser par autoclavage à 121°C pendant 15 minutes. Laisser les tubes refroidir en pente.
Composition citrate de Simmons |
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|---|---|---|---|
| Ingredients | gram/litre | Ingredients | gram/litre |
| Citrate de sodium | 1g | Chlorure de sodium | 5.0g |
| Sulfate de magnésium | 0.2g | Phosphate mono-ammonique | 1g |
| Phosphate dipotassique | 1g | Bleu de bromothymol | 0,08g |
| Agar | 15g | pH final | 6,8 ± 0,2 |
Ⅲ. Principe
Dans les organismes capables d'utiliser le citrate comme source de carbone, l'enzyme citrase hydrolyse le citrate en acide oxaloacétique et en acide acétique.
L'acide oxaloacétique est ensuite hydrolysé en acide pyruvique et CO2. Si du CO2 est produit, il réagit avec les composants du milieu pour produire un composé alcalin (par exemple Na2CO3).
Le pH alcalin fait passer l'indicateur de pH (bleu de bromthymol) du vert au bleu.
Ⅳ.Interpretation citrate de simmons
Bactéries citrate positives : Une réaction positive est indiquée par une croissance avec une couleur bleue intense dans l'inclinaison : klebsiella pneumoniae, Enterobacter, Citrobacter, Providencia, Proteus mirabilis, Serratia, vibrio cholerae, Pseudomonas, Salmonella enteritidis et membres des sous-genres Salmonella II, III et IV.
Bactéries citrate négatives : Une réaction négative est mise en évidence par l'absence de croissance à trace de croissance sans changement de couleur (le milieu reste vert foncé) : Escherichia coli, Shigella, Yersinia, Edwardsiella
Reference
- wyoming university - SIMMON’S CITRATE AGAR
- FDA - BAM Media M138: Simmons Citrate Agar
- BBL™ Simmons Citrate Agar Slants
- thermofisher - Simmons Citrate Agar (Dehydrated)
- ASM - Citrate Test Protocol
- Sigma-Aldrich - Simmons Citrate Agar
- Handbook of MICROBIOLOGICAL MEDIA Fourth Edition