Indole | Urée | Tryptophane désaminase

Le milieu Urée Indole permet la mise en évidence de l'uréase, de la tryptophane désaminase et de la production d'indole (le milieu contribue à la mise en évidence des caractères d'identification des Entérobactéries).

Principe

Les bactéries possédant une uréase transforment l'urée en carbonate d'ammonium entraînant une alcalinisation qui provoque une coloration rouge violacé du milieu en présence de rouge de phénol (indicateur de pH). La production d'indole est mise en évidence par l'addition de réactif de Kovacs (code 55313) qui agit avec l'indole en donnant une coloration rouge dans la partie supérieure du milieu en cas de réaction positive. La présence de tryptophane désaminase (TDA) est mise en évidence par addition de perchlorure de fer qui provoque une coloration brun rouge du milieu en cas de réaction positive.

Composition

                L-Tryptophane      ...........  3 
                KH2PO4   .....................  1 
                K2HPO4     ...................  1 
                Chlorure de sodium ...........  5 
                Urée     ................... .. 20 
                Alcool à 95°       ........... 10 ml 
                Rouge de phénol    ........... 0,05 
                pH final : 6,8 ±0,2
                
        

Lecture

1. Présence d'une uréase

◈ Le milieu vire au rouge violacé, en absence d'uréase, la coloration du milieu reste inchangée.

• - en 5 à 10 minutes pour Proteus morganii et Yersinia enterocolitica
• - en 2 à 4 heures pour les autres Proteus
• - en 12 à 18 heures pour les Klebsiella et quelques Citrobacter.

✔ Pour plus de détails sur le test à l'uréase

2. Recherche de la production d'indole

Après 24 heures d'incubation, verser 4 à 5 gouttes de réactif Kovacs (code 55313) dans le tube de milieu Urea Indole ensemencé : la présence d'indole est révélée par l'apparition d'une coloration rouge à la surface du milieu.

✔ Pour plus de détails sur le Indole test

3. Recherche de la T.D.A.

Après 24 heures d'incubation, verser dans le tube du milieu Urea Indole 1 à 2 gouttes de Ferric Chloride Solution

• - coloration brun rouge : T.D.A. (+)
• - coloration jaune orangée : T.D.A. (-)

Résultats