prélèvement de gorge

1. EQUIPEMENT :

- Etuve avec CO2 à 35C° - Microscope optique binoculaire - Densitomètre

2. MATERIEL :

-Lames - Pipettes Pasteur en verre - Ecouvillons en coton

3. REACTIFS :

→Bleu de méthylène

→ Colorants pour le Gram (violet de Gentiane, Lugol, alcool à 70°, fuschine)

→Tubes d’eau physiologique stérile

→Milieux de culture :

                        - Gélose au sang frais
                        - Gélose au sang cuit
                        - Gélose au sang cuit+vancomycine+colistine+fungizone (VCF)
                        - Gélose Chapman
                        - Gélose Sabouraud+chloramphénicol
                        - Gélose chocolat+supplément G
                        - Gélose Tinsdale

→ Disques de facteurs de croissance X, V, VX-OXOID : Réf. : x2184c

→ Pastorex Strep-Bio-Rad: Réf. : 61721

→ Serums d’agglutination pours Pseudomonas aeruginosa-Bio-Rad: Réf. : 92430

→ Auxacolor 2-Bio-Rad- Réf. : 56513

→ Disques d’antibiotiques

→ Disques d’antifongiques.

4. PROTOCOLE :

4.1. Généralités :

↪ L’ensemencement des prélèvements se fait immédiatement après vérification du numéro d’enregistrement de la fiche de renseignement et de l’échantillon

↪- Préparer et numéroter les géloses à ensemencer ainsi que les lames pour la coloration de Bleu de méthylène.

4.2. Germes recherchés :

4.2.1 Recherche en routine:

- Streptocoques ß-hémolytiques du groupe A, C et G

- Staphylococcus aureus

- Entérobactéries et autres BGN

- Moraxella catarrhalis

- Arcanobacterium haemolyticum

- Candida albicans

4.2.2 Recherche sur demande:

- Corynebacterium diphteriae (dans le cadre d’une angine pseudomembraneuse)

- Neisseria gonorrhoeae (dans le cadre d’un bilan d’IST)

4.3. Examen direct :

- un frottis est réalisé sur une lame microscopique directement à partir du prélèvement

- faire une coloration au bleu de méthylène

- signaler la présence ou l’absence des polynucléaires neutrophiles, lymphocytes.

- noter la présence d’une flore prédominante

4.4. Ensemencement et incubation :

4.6. Lecture :

→ La lecture se fait après 24 et 48h d’incubation

4.7. Identification :

4.8. Antibiogramme :

→ Bactérie isolée : se référer au fascicule de standardisation de l’antibiogramme à l’échelle nationale

Technique de l’ECB du prélèvement de gorge