❖ Il est obtenu par ponction de la collection.
❖Immédiat dés la réalisation de la ponction.
1/ Milieu de culture : gélose au sang frais (sang de mouton), GSC,Columbia + sang de cheval pour les bactéries anaérobies.
2/Microscope optique
3/Colorants
4/ Petit matériel :anse de platine, pipettes, lames, colorants.
1er jour:
Examen microscopique : à partir du prélèvement, réaliser 02 frottis :
→Un coloré au Bleu de Méthylène : PN altérés, présence de bactéries
→L’autre au Gram : bactéries
La mise en culture :
→ Ensemencer une gélose au sang + GSC à incuber en aérobie sous CO2.
→ Ensemencer une gélose Columbia + sang de cheval préparé le jour même à incuber en anaérobiose.
2ème jour:
Lecture des boites incubées en aérobiose:
❖sur la GSF → rechercher des colonies de Streptocoque βhémolytique et des colonies de Staphylococcus aureus, si présence de colonies suspectes de ces 02 germes faire des réisolements sur GSF ( streptocoque du groupe B) et sur GN ( Staphylococcus aureus)
- si absence de colonies en faveur, reincuber les boites.
❖Sur la GSC : rechercher des colonies grises brillantes en faveur de l’haemophilus
-Si présence de cet aspect de colonies → faire réisolement sur GSC
-Si absence → RI de la GSC → réincubation
3ème jour:
❖Lecture des boites réincubées pour recherche des mêmes germes
- Si présence de colonies en faveur des germes recherchés faire des réisolement sur milieux adéquats
- Si absence → absence de germes aérobies pathogènes.
Les colonies réisolées seront identifiées.
- S’il s’agit de bactéries pathogènes → antibiogramme
❖La lecture de la culture anaérobie se fera au 2ème jour puis au 5ème jour.
- Si culture anaérobie positive → identification + antibiogramme
- Si culture anaérobie négative → absence de bactéries anaérobies.
