Contenu :
Le test de Widal, également appelé test d'agglutination de Widal, est un test sérologique utilisé pour un diagnostic présomptif de la fièvre typhoïde et de la fièvre paratyphoïde, causées par certaines bactéries nommées Salmonelle. Dans cet article, nous explorerons son principe, ses procédures et comment interpréter les résultats des tests.
◉ Définition
Un test Widal est un test sanguin qui détecte la présence d'anticorps contre les bactéries responsables de la fièvre typhoïde et de la fièvre paratyphoïde. Ces bactéries sont Salmonella Typhi et Salmonella Paratyphi A et B.
La fièvre typhoïde, également connue sous le nom de fièvre entérique, se propage généralement par des aliments et des boissons contaminés. Elle provoque des symptômes tels qu’une forte fièvre, de la fatigue, des maux de tête, des douleurs à l'estomac et de la diarrhée, et peut constituer une maladie très grave.
Le test est basé sur le principe de l'agglutination, c'est-à-dire l'agrégation de bactéries et d'anticorps en détectant des anticorps spécifiques produits par le système immunitaire en réponse aux antigènes présents dans les bactéries Salmonella.
Le test Widal est simple et peu coûteux, cependant, elle souffre d'un manque de standardisation, d'une faible spécificité et d'une interprétation inappropriée des résultats, en particulier dans les zones endémiques. Par conséquent, les résultats des tests doivent être interprétés avec prudence et en conjonction avec d'autres résultats cliniques et de laboratoire.
◉ Qui devrait passer le test Widal ?
Le test Widal est indiqué pour les patients qui présentent:
- Antécédents de fièvre depuis plus de cinq jours.
- Symptômes gastro-intestinaux.
- Ne répondez pas à un traitement antibiotique empirique.
- présentez des signes et symptômes cliniques évocateurs de la fièvre typhoïde (fièvre, diarrhée, taches rouges sur le corps, etc.).
- N'avoir aucun autre foyer d'infection évident.
◉ Principe
Le système immunitaire du patient réagit à une infection bactérienne à Salmonella en générant des anticorps contre la bactérie. Ces anticorps visent à neutraliser l’infection et deviennent généralement détectables dans le sang environ 6 jours après le début de l’infection.
- Anticorps contre l'antigène flagellaire de Salmonella typhi (H).
- Anticorps contre l'antigène flagellaire de S.paratyphi A (AH).
- Anticorps contre l'antigène flagellaire de S.paratyphi B (BH).
- Anticorps contre l'antigène somatique de S.typhi (O).
Le test Widal fonctionne en détectant dans le sérum du patient ces anticorps spécifiques contre Salmonella à l'aide d'antigènes de Salmonella préparés (réactifs disponibles dans le commerce).
- Un résultat positif est indiqué par la présence d'une agglutination.
- L'absence d'agglutination indique un résultat négatif.
Note:
- Un résultat négatif n'exclut pas un diagnostic de salmonellose
- Les antigènes paratyphoïdes O ne sont pas utilisés car ils réagissent de manière croisée avec l'antigène typhoïde O.
◉ Réactifs
Le kit de test contient les réactifs suivants
- Réactif 1 : S.typhi (H), contient l'antigène H de Salmonella typh.
- Réactif 2 : S.typhi (O), contient l'antigène O de Salmonella typh.
- Réactif 3 : S.paratyphi A (AH), contient l'antigène H de Salmonella paratyphi A.
- Réactif 4 : S.paratyphi B (BH), contient l'antigène H de Salmonella paratyphi B.
- Contrôle négatif (NC) : ce contrôle ne contient pas d'anticorps contre Salmonella typhi et sert de référence pour valider les résultats des tests. Cela ne devrait pas produire de réaction positive.
- Contrôle positif (PC) : il est utilisé pour garantir que le test fonctionne correctement et doit produire une réaction positive.
◉Quelles sont les préparations pour réaliser un test Widal ?
Aucune préparation spécifique n'est requise pour le test sanguin Widal. Cependant, votre médecin peut vous conseiller d'éviter certains médicaments, certains aliments ou toute activité intense dans les heures précédant le test.
◉ Types et méthodes de test WIDAL
Le test Widal peut être réalisé soit sur lame, soit dans un tube et peut être qualitatif ou quantitatif, en fonction du protocole de test et des exigences médicales
- Méthode Widal test sur lame : une goutte du sérum du patient est mélangée aux antigènes sur la lame et la réaction est observée pour déterminer l'agglutination (agglutination).
- Méthode Widal dans un tube : le test d'agglutination en tube est effectué dans de petits tubes à essai et offre plus de précision par rapport à la technique d'agglutination sur lame.
- Test qualitatif : il est effectué sur une lame à des fins de dépistage, déterminant si des anticorps contre des antigènes spécifiques de Salmonella sont présents ou absents dans le sérum du patient et ne fournit pas de niveaux de concentration d'anticorps spécifiques.
- Test quantitatif : il est effectué pour les échantillons qui ont montré une agglutination positive lors du test qualitatif. Les titres d'anticorps (concentration) dans le sérum du patient sont déterminés.
◉ Procédures du test Widal
◉ 1. Widal test sur lame
- Prélevez un échantillon de sang du patient et laissez-le coaguler.
- Une fois le caillot formé, centrifugez l'échantillon pour séparer le sérum des cellules.
- Placez une goutte de sérum sur une lame de verre propre et étiquetez-la avec le nom du patient et la date.
- Ajoutez une goutte de solution antigénique (contenant Salmonella typhi et Salmonella paratyphi tuées) à la goutte de sérum.
- Mélangez les deux gouttes à l'aide d'un cure-dent propre ou d'une tige en verre, en vous assurant qu'elles sont bien mélangées.
- Faites tourner la lame lentement pendant 4 minutes pour permettre l'agglutination.
- Examinez la lame au microscope à un grossissement 40 x pour rechercher une agglutination. L'agglutination des bactéries indique un résultat positif.
◉ 2. Test Widal dans un tube
- Prélevez un échantillon de sang du patient et laissez-le coaguler.
- Une fois le caillot formé, centrifugez l'échantillon pour séparer le sérum des cellules.
- Étiquetez quatre tubes à essai avec le nom du patient et la date.
- Ajoutez une dilution différente de la solution d'antigène dans chacun des tubes à essai.
- Ajoutez une quantité fixe de sérum du patient dans chaque tube à essai.
- Mélanger soigneusement le contenu de chaque tube à essai.
- Incuber les tubes à essai à 37 °C pendant 24 heures.
- Examinez les tubes à essai pour déceler l'agglutination. L'agrégation des bactéries indique un résultat positif.
◉ Résultat normal du test Widal
Le résultat du test est rapporté comme le rapport de la dilution la plus élevée du sang du patient qui donne une réaction positive. Par exemple, un résultat de 1:160 pour l'antigène O signifie que le sang du patient a dû être dilué 160 fois avant qu'aucune agglomération ne soit observée.
Le résultat normal du test Widal varie légèrement d'un laboratoire à l'autre, mais généralement, les titres d'antigènes O et H doivent être inférieurs à 1:160 pour être considérés comme négatifs. Les titres supérieurs à 1:160 à 1:320 ou au-delà sont considérés comme positifs et indiquent la présence de typhoïde ou de paratyphoïde.
◉ Interprétations des résultats
L'interprétation du test Widal peut varier en fonction du type de test (qualitatif ou quantitatif), des niveaux d'anticorps, de la progression de la maladie, des symptômes du patient et des résultats d'autres tests.
◉ 1. Titre d'anticorps
S. Typhi interpretation:
- Résultat négatif : le titre de S. Typhi est inférieur ou égal à 1:80.
- Résultat positif : le titre de S. Typhi est supérieur ou égal à 1:160
Interprétation de S. Paratyphi
- Résultat négatif : le titre de S. Paratyphi est inférieur ou égal à 1:80.
- Résultat positif : le titre de S. Paratyphi est supérieur ou égal à 1:160.
◉ 2. Progression de la maladie
- Les anticorps O apparaissent plus tôt et disparaissent plus rapidement que les anticorps H. Les anticorps H apparaissent plus tard et persistent plus longtemps que les anticorps O.
- Si des anticorps anti-O sont détectés à un niveau élevé sans présence d'anticorps anti-H, cela indique une infection récente.
- Une augmentation isolée des anticorps anti-H suggère une infection à Salmonella de longue date.
- La présence d'anticorps anti-H dirigés contre S. Typhi, Paratyphi A et B indique une vaccination antérieure.
- Pour un diagnostic précis, deux échantillons de sang doivent être prélevés à 15 jours d'intervalle.
◉ 3. limites du test
Il existe certaines limites et défis dans l'interprétation des résultats du test Widal, tels que:
- Une vaccination antérieure contre la typhoïde peut conduire à un résultat positif incorrect.
- Réactivité croisée avec d'autres infections (typhus, troubles immunologiques ou maladie hépatique chronique).
- Variation des taux d'anticorps selon les différentes populations.
- Les tests effectués dans les sept jours suivant la maladie et après quatre semaines sont généralement négatifs.
- Test dépendant de l'opérateur.
Les résultats du test Widal doivent être interprétés avec soin et en conjonction avec d'autres résultats cliniques et de laboratoire.
◉ Tests associés
En plus du test de Widal, plusieurs autres tests de diagnostic sont couramment utilisés pour diagnostiquer la fièvre typhoïde et paratyphoïde et les différencier des autres maladies fébriles. Certains des tests de diagnostic couramment utilisés incluent :
- Homoculture : l'hémoculture consiste à prélever du sang veineux, qui est ensuite cultivé pour rechercher des micro-organismes. Il est considéré comme la référence en matière de diagnostic de la fièvre typhoïde et paratyphoïde.
- Culture de selles : une culture de selles est réalisée pour isoler Salmonella typhi et Salmonella Paratyphi à partir d'échantillons fécaux. Bien qu'elles soient moins sensibles que les hémocultures, elles peuvent être utiles pour détecter les porteurs de la bactérie.
- Culture de moelle osseuse : la culture de moelle osseuse est un test très sensible pour diagnostiquer la fièvre typhoïde et paratyphoïde, en particulier dans les cas où les hémocultures et les hémocultures sont négatives ou peu concluantes.
- Réaction en chaîne par polymérase (PCR) : comme le test typhoïde/paratyphoïde (TPT), la PCR est une technique de diagnostic moléculaire qui peut détecter le matériel génétique (ADN) directement à partir d'échantillons cliniques.
- Tests sérologiques : tels que (test ELISA-Ty), sont disponibles pour détecter des anticorps spécifiques contre Salmonella typhi et Salmonella Paratyphi dans le sérum du patient. Ces tests mesurent la présence d'anticorps IgM et IgG et peuvent être utiles pour détecter des infections récentes.
◉ Conclusion
En résumé, le test Widal est un test sérologique utilisé pour détecter les anticorps contre Salmonella typhi et Salmonella paratyphi dans le sang. Il facilite le diagnostic et le suivi des cas de fièvre typhoïde et paratyphoïde, en complément d'autres résultats cliniques.
Bien que le test ait ses limites, il joue un rôle important dans la gestion et la surveillance de ces maladies infectieuses