Gélose MacConkey | Principe | Préparation | Interpretation


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Ⅰ. Généralités

Ⅱ. Préparation / Composition

Suspendre les composants, poudre déshydratée, dans l'eau (49.53 grammes dans 1000 ml d'eau purifiée/distillée). Le milieu est bouilli pendant quelques secondes jusqu'à dissolution complète des ingrédients. Stériliser par autoclavage à une pression de 15 lb (121°C) pendant 15 minutes.

Refroidir à 47°C, bien mélanger avant de verser dans des boîtes de Pétri stériles.


◈ Le lactose dans le milieu peut être remplacé par d'autres sucres : MacConkey au sorbitol.

◈ Une variante de la gélose MacConkey sans cristal violet ni sel peut être utilisée pour limiter l'essaimage de Proteus spp.


Ⅲ. Principe et interpretation

◈ La gélose MacConkey est un milieu sélectif et différentiel utilisé pour l'isolement et la différenciation de bacilles à Gram négatif non exigeants, en particulier les membres de la famille des entérobactéries et du genre Pseudomonas.

◈ La sélectivité :Le colorant violet cristal et les sels biliaires arrêtent la croissance des bactéries gram-positives. Cela permet uniquement aux espèces gram-négatives, qui ont une membrane externe relativement résistante à la bile, de former des colonies sur gélose MacConkey

◈ La différenciation : Les bactéries Gram-négatives qui poussent sur MacConkey se différencient par leur capacité à fermenter le lactose.

  • Les bactéries qui fermentent le lactose font diminuer le pH du milieu, cette diminution est détecté par le rouge neutre, qui est de couleur rouge à des pH inférieurs à 6,8. Lorsque le pH baisse, le rouge neutre est absorbé par les bactéries, qui apparaissent sous forme de colonies rose vif à rouge sur la gélose : Escherichia coli, Enterobacteria, Klebsiella
  • Les bactéries à Gram négatif qui se développent sur la gélose MacConkey mais ne fermentent pas le lactose apparaissent incolores sur le milieu et la gélose entourant les bactéries reste relativement transparente : Salmonella, Proteus, Yersinia, Pseudomonas


Note:

Les bactéries Gram-positives ne formeront aucune colonie sur le milieu MacConkey (avec quelques exception).

Les bactéries à forte fermentation du lactose produisent suffisamment d'acide pour provoquer la précipitation des sels biliaires, ce qui entraîne un halo rose dans le milieu entourant les colonies individuelles ou les zones de croissance confluente.

Les fermenteurs faibles du lactose formeront des colonies plus lentement que les autres. Exemple: Serratia, Citrobacter

Les fermenteurs lents du lactose peuvent apparaître sous forme de colonies incolores. Exemple: Enterobacter (Plus de details )

Les bactéries encapsulées produisent des capsules en utilisant du lactose. Cela donne des colonies collantes d'apparence humide. Exemple: Klebsiella, Enterobacter


Ⅳ. Variants du milieu Macconkey

1- MacConkey au sorbitol (Sorbitol-containing MacConkey agar (SMAC))

2- MacConkey sans cristal violet ni sel

Le chlorure de sodium est supprimé du milieu pour fournir un milieu déficient en électrolytes empêchant Proteus spp de se propager. De plus, ce milieu ne contient pas de cristal violet permettant la croissance de Staphylococcus, Enterococcus et Mycobacterium spp.



Références:

  1. Color Atlas of Medical Bacteriology 4ed
  2. Acumedia - MacCONKEY AGAR W/O CRYSTAL VIOLET & SALT (7378)
  3. Mary E. Allen - MacConkey Agar Plates Protocols
  4. Thermo Fisher Scientific - MAC CONKEY AU SORBITOL (GELOSE) (S.M.A.C.)
  5. KENNETH (K.P.) SMITH - The Origin of MacConkey Agar
  6. Benjamin Jung; Gilles J. Hoilat.- MacConkey Medium
  7. University Ave- MACCONKEY AGAR