- être détectée pendant une infection secondaire (réactivation ou réinfection)
- être observée du fait d’une stimulation polyclonale du système immunitaire
- résulter de la persistance de traces d'lgM plusieurs mois voire années après la primo-infection
- résulter d'une réaction croisée avec les IgM d'autres herpes virus, en particulier le virus Epstein-Barr (EBV)
✑ Dr.Midireh.l
☰ Sommaire :
- Généralité
- Prélèvements
- Les personnes âgées de plus d'un an
- Diagnostic de l'infection congénitale à CMV
◉ Généralité
Le cytomégalovirus (CMV) est le plus grand membre de la famille des virus Herpesviridae et est un virus à ADN, omniprésent, qui infecte presque tous les humains à un moment donné de leur vie.
La plupart des personnes en bonne santé infectées par ce virus peuvent ne présenter aucun symptôme. Le diagnostic d'infection à cytomégalovirus est très important dans deux situations majeures :
- Chez les patients immunodéprimés, y compris les receveurs de greffe, l'infection à CMV peut être mortelle.
- Pendant la grossesse, il est reconnu comme l'infection virale congénitale la plus courante et l’un des principales causes de perte auditive et visuel de votre bébé.
Structure du cytomégalovirus en microscopie électronique (1. Nucléocapside; 2. enveloppe; 3. tégument)
◉ Prélèvements
Le virus entier, son génome ou ses antigènes sont recherchés principalement dans le sang(héparine pour la culture, EDTA/sang tota pour la recherche d’acides nucléiques) mais aussi dans divers échantillons tels que les urines, la salive, les liquides de lavage broncho-alvéolaire (LBA), le liquide céphalo-rachidien (LCR), les biopsies, le liquide amniotique (à partir de la 21ème SA et au moins 6 semaines après la primo-infection), les tissus fœtaux
Sérum (tube sec) pour les recherches sérologiques
Diagnostic de l'infection à CMV pour les personnes de plus de 12 mois◉ Diagnostic de l'infection à CMV pour les personnes âgées de plus d'un an
◉ Sérodiagnostic CMV
Le sérodiagnostic des infections à CMV repose habituellement sur la détection des IgG et des IgM spécifiques par des techniques immuno- enzymatiques de type ELISA ou des techniques équivalentes (les techniques d'immunocapture sont à privilégier car elles limitent le risque de réactions faussement positives liées à la présence de facteur rhumatoïde).
☰ Lors de la détection d'lgM spécifiques du CMV(après une période d’incubation de 28 à 60 jours (40 jours en moyenne)), il faut prendre en compte la difficulté d'interprétation de ce résultat ( n’indique pas toujours une primo-infection récente à CMV ). Elle peut en effet :
⤑ Test de mesure d’avidité des IgG anti-CMV
la mesure de l'indice d'avidité des IgG anti-CMV permet de différencier une primo-infection récente d’une infection ancienne.
- une faible avidité⟼ primo-infection récente
- une forte avidité⟼ infection plus ancienne / infection secondaire
NB:L’interprétation des index d’avidité est délicate et nécessite une très bonne connaissance des tests (voir reference N°:01).
⤑ Cas 1: lgM-CMV positif et 'lgG-CMV négatif
Peut correspondre à une primo-infection ou à une réaction faussement positive. Dans le cas d'une primo-infection, un deuxième sérum prélevé a quelques jours d'intervalle doit démontrer une séroconversion au niveau des IgG (avec un indice de l'avidité très faible). L'absence de séroconversion IgG permettant d'écarter l'éventualité d'une primo-infection CMV.
⤑ Cas 2: lgM-CMV positif et 'lgG-CMV positif
- 1- Le diagnostic de primo-infection à CMV peut être porte sur la présence d'lgM associée à une faible avidité des IgG. Un contrôle sérologique ultérieur, montrant une ascension du taux des IgG, apporte un element supplémentaire de confirmation
- 2- La présence d'lgM anti-CMV avec une forte avidité des IgG peut résulter lors d'une réactivation ou réinfection récente, d'une réaction sérologique croisée ou d'une activation polyclonale des IgM expliquée par le contexte infectieux.
◉ PCR / gène cible
- Les tests basés sur la PCR en temps réel pour le CMV permettent une détection rapide et spécifique avant l’apparition de symptômes cliniques, afin d’améliorer le pronostic, ce qui est particulièrement important chez les patients receveurs d’allogreffes d’organes ou de moelle osseuse et les patients atteints du VIH/sida.
- Gène cible pour CMV: Gène codant pour la protéine ppUL83
◉ Culture cellulaire
Cette technique permet d’isoler et conserver les souches virales. Néanmoins, elle n’est plus utilisée pour le diagnostic courant de l’infection en raison de son délai de rendu, de sa lourdeur de réalisation et de sa sensibilité inférieure à celle des techniques de biologie moléculaire
Les cellules de choix sont les fibroblastes embryonnaires humains de poumon (cellules MRC-5) en monocouches confluentes d’au moins 48 heures. L’effet cytopathique caractéristique (ECP) du CMV, observé en microscopie inversée, est constitué de foyers ovalaires de cellules augmentées de volume et réfringentes, qui progressent lentement selon le grand axe des fibroblastes.
Un délai de 8 à 20 jours est nécessaire pour observer les premiers foyers mais il peut aller jusqu'à 6 semaine
Cytopathique observé du CMV est classiquement décrit à foyers en « banc de poissons»
La Culture orientée (culture rapide) associe une centrifugation des prélèvements sur les fibroblastes, et la détection par immunocytochimie, après 24 à 48 heures d'incubation, des antigènes très précoces (l'antigène immediate-early (IE)) synthétisés au cours du premier cycle de réplication virale. Cette méthode est plus sensible que la culture non orientée pour les prélèvements contenant du virus libre (urine par exemple) et réalisable plus rapidement. Néanmoins, sa mise en œuvre reste assez lourde. Elle ne permet pas l’isolement de la souche.
◉ Diagnostic de l'infection congénitale à CMV (âge moins de 1 an)
Un diagnostic anténatal peut être demandé lorsqu’il y a un diagnostic (ou une suspicion) d’infection maternelle récente à CMV (surtout survenue pendant la 1 moitié de grossesse), et/ou une suspicion d’infection fœtale du fait de l’existence de signes échographiques compatibles avec une infection à CMV
Ce diagnostic est basé sur une amniocentèse, réalisée au moins 6-8 semaines après la primo-infection et après la 21 semaine de grossesse, qui permet la réalisation d’un prélèvement de liquide amniotique à partir duquel rechercher la présence du virus par culture rapide ou PCR
Diagnostic à la naissance :L’excrétion de virus par le nouveau-né est recherchée par culture rapide ou PCR au cours des trois premières semaines de vie. Au-delà de 3 semaines , il ne peut être assuré que l’infection n’a pas été acquise en post-natal
Un diagnostic tardif peut être demandé chez le nourrisson et le jeune enfant, asymptomatique à la naissance, mais qui développe des séquelles dans les cinq à sept premières années de vie, telles que perte d’audition, retard mental, retard de développement psychomoteur et/ou déficience visuelle.