Contenu :
Gélose PALCAM Listeria | Principe | Préparation | Interpretation
Ⅰ. Généralités
Gélose PALCAM Listeria est un milieu différentiel et très sélectif utilisé pour l'isolement et la détection de Listeria ssp., particulièrement L.monocytogenes à partir d'aliments et d'échantillons cliniques.
Le milieu inhibe complètement la microflore alimentaire courante en raison de la présence de chlorure de lithium, de ceftazidime, de polymyxine B et de chlorhydrate d'acriflavine. La reconnaissance des colonies de Listeria est évidente par la décoloration noire du milieu due à l'hydrolyse de l'esculine.

Gélose PALCAM Listeria
Ⅱ. Préparation / Composition
Suspendre les composants, poudre déshydratée, dans l'eau (34.5g dans 500 ml d'eau purifiée/distillée). Le milieu est bouilli pendant quelques secondes jusqu'à dissolution complète des ingrédients.
Stériliser à l'autoclave à 121°C pendant 15 minutes. Refroidir à 50°C et ajouter de manière aseptique le Supplément Sélectif PALCAM.
Composition gélose PALCAM Listeria |
|||
---|---|---|---|
Ingrédients | gramme/litre | Ingrédients | gramme/litre |
Base de gélose au sang Columbia | 39g | Mannitol | 10g |
Extrait de levure | 3g | Rouge de phénol | 0.08g |
Glucose | 0.5g | Chlorure de lithium | 15g |
Esculine | 0.8g | pH final | 7.2 ± 0.2 |
Citrate ferrique d'ammonium | 0,5g |
◈ la composition du Supplément Sélectif PALCAM (par litre) : Sulfate de Polymyxine B = 10mg, Ceftazidime = 20mg, Chlorhydrate d'acriflavine = 5mg
Ⅲ. Principe
◉ La PALCAM Listeria est un milieu sélectif et différentiel pour l'isolement et la différenciation des agents pathogènes à partir d'échantillons cliniques.
◈ La sélectivité : la sélectivité du milieu est assurée par la présence de chlorure de lithium, de sulfate de polymyxine B, de HCI d'acriflavine et de ceftazidime, qui inhibent la croissance de la plupart des espèces autres que les Listeria spp. contenues dans les aliments et les échantillons cliniques. La polymyxine B agit contre les bactéries Gram-négatives, la Ceftazidime est active contre les Gram-positifs et les entérobactéries, l'Acriflavine inhibe de nombreuses bactéries Gram-positives.
◈ La différenciation : la différenciation est basée sur l'hydrolyse de l'esculine et sur la fermentation du mannitol.
- Listeria hydrolyse, et cela se manifeste par un noircissement du milieu.
- Listeria ne fermente pas le mannitol, donc une différenciation facile des contaminants, tels que les entérocoques et les staphylocoques, qui fermentent le mannitol.
Ⅳ. Lecture / Interpretation
◈ Après 42 à 48 h à 37°C en aérobies, en général :
Organismes | Croissance |
---|---|
Listeria monocytogenes | Croissance bonne à importante ; colonies gris-vert cernées d'une auréole marron foncé à noir dans le milieu |
Escherichia coli | Inhibition partielle à complète |
Enterococcus faecalis | Inhibition complète |
Pseudomonas | Inhibition partielle à complète |
Sans ensemencement | Rouge, aspect transparent à très légèrement voilé |