Sommaire :
◉ Définition
La plupart des souches d’Haemophilus spp ne poussent pas sur 5% de gélose de sang de mouton, qui contient de l’hémine (facteur X) mais manque de NAD (facteur V).
Haemophilus influenzae utilise le facteur X pour produire des enzymes respiratoires essentielles comme les cytochromes, les catalases et les peroxydases. Le facteur V est utilisé comme vecteur d’électrons dans le système d’oxydation-réduction de l’organisme.
Le staphylocoque doré produit la NAD comme sous-produit métabolique lorsqu’il pousse dans un milieu de culture contenant du sang. Par conséquent, Haemophilus spp peut croître sur la gélose au sang de mouton très près des colonies de Staphylococcus aureus (car il produit le facteur NAD), ce phénomène est connu sous le nom de Satellitisme.
◉ Mode opératoire
- Mélangez des colonies suspecte d'Haemophilus dans 2 ml de solution saline stérile ou d'eau stérile peptonée.
- À l’aide d’un écouvillon stérile, inoculer la suspension de l’organisme sur une bote de gélose nutritive et une plaque de gélose sanguine.
- Tracer une culture pure de S. aureus sur chacune des boites inoculées.
- Incuber les deux boites dans une atmosphère enrichie en dioxyde de carbone à 37C pendant 18 heures.
- Examiner les cultures pour détecter la croissance et les colonies satellites.
◉ Interprétation du résultat
- Haemophilus influenzae : montre la croissance sur la boite de gélose sanguine, mais pas sur la boite de gélose nutritive, et les colonies près de la colonne de croissance de S. aureus sont plus grandes que celles loin d’elle.
-Si des colonies satellites sont présentes sur les deux boites, l’organisme est probablement une espèce d’Haemophilus qui ne nécessite que le facteur V (NAD) comme H. parainfluenzae.
