Test de l’Oxydase

☰ Le test de l’oxydase est un test de détection de l’enzyme cytochrome oxydase chez les bacteries Gram négative qui produisent cette enzyme, telles que Neisseria ou Pseudomonas.

☰ Les Disques Oxydase (OX) sont des disques de papier absorbant imprégnés de N,N,N’,N’-Tetramethyl-p-phenylenediamine dihydrochloride. En présence de cytochrome oxydase, le N,N,N’,N’-Tetramethyl-p-phenylenediamine dihydrochloride (incolore) forme un composé coloré en bleu.

Mode Opératoire de l'Oxydase

• A l’aide de pinces, placer un disque d’oxydase sur une lame porte objet.
• Choisir une colonie bien isolée et représentative de la culture fraiche à tester.
• Prélever la colonie choisie à l’aide d’un bâtonnet ou d’une öse.
• NE PAS UTILISER d’öse de métal (à l’exception du platine) cela peut provoquer des réactions faussement positives.
• Frotter doucement la colonie sur le disque et observer l’apparition d’une coloration violette dans un délai de 30 secondes.

Lecture de test de l'Oxydase:

☰ Réaction positive : coloration bleu foncé à violet apparaissant dans un délai de 30 secondes.

☰ Réaction négative : absence de coloration ou coloration au-delà de 30 secondes.

Les Bactéries Oxydase Positive / Négative

☰ Oxydase Variable : (positive ou négative selon les souches) : Actinobacillus, Brucella, Haemophilus, Pasteurella.

Limites d'utilisation :

• Il est nécessaire de faire des tests biochimique et/ou sérologique complémentaires pour une identification d'espèce précise.
• Un inoculum insuffisant peut générer une coloration faible ou tardive.
• Des colonies prélevées sur des milieux contenant des nitrates peuvent produire un résultat incohérent.
• Les milieux contenant une forte proportion de sang peuvent générer un résultat faussement positif.
• Il est indispensable de procéder à partir de cultures pures et fraîches pour que les résultats puissent être interprétés.