Gélose TCBS | Gélose sélective Vibrio
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Ⅰ. Généralités
La gélose au thiosulfate-citrate-sels biliaires-saccharose, gélose TCBS, est un milieu de culture sélectif et différentiel qui est utilisé pour l'isolement et la culture de Vibrio cholerae et d'autres Vibrio spp. partir d'échantillons cliniques, eaux, spécimen alimentaire et d'autres matières.
La gélose TCBS a été mise au point par Kobayashi et al, qui ont modifié le milieu sélectif de Nakanishi. .
Vibrio cholerae sur TCBS
Ⅱ. Préparation / Composition
Suspendre les composants, poudre déshydratée, dans l'eau (88.1 g dans 1000 ml d'eau purifiée/distillée). Porter à ébullition et dissoudre complètement le milieu. NE PAS AUTOCLAVER
Refroidir le milieu à environ 50°C et verser dans des boîtes de Petri stériles.
Composition gélose TCBS |
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|---|---|---|---|
| Ingrédients | Gramme/litre | Ingrédients | Gramme/litre |
| Saccharose | 20.0 g | Dipeptone | 10.0 g |
| Citrate de sodium | 10.0 g | Thiosulfate de sodium | 10,0 g |
| Chlorure de sodium | 10,0 g | Extrait de levure | 5,0 g |
| Oxbile (Oxgall) | 5,0 g | Cholate de sodium | 3,0 g |
| Citrate ferrique | 1,0 g | Bleu de bromothymol | 0,04 g |
| Thymol bleu | 0,04 g | Gélose | 15,0 g |
Oxgall est une substance naturelle contenant un mélange de sels biliaires, et de cholate de sodium, un sel biliaire pur
Ⅲ. Principe
Les fortes concentrations de thiosulfate et de citrate et la forte alcalinité de ce milieu inhibent largement la croissance des Enterobacteriaceae.
La bile de boeuf et le cholate sodium inhibent les bactéries Gram-positives.
Le thiosulfate de sodium sert également de source de soufre et sa présence, en combinaison avec le citrate ferrique, permet de détecter facilement la production de sulfure d'hydrogène.
Le saccharose (saccharose) est inclus comme hydrate de carbone fermentable, toute bactérie coliforme susceptible de se développer ne peut pas métaboliser le saccharose. Seules quelques souches de Proteus positives au saccharose peuvent se développer pour former des colonies jaunes ressemblant à des vibrides.
L'indicateur mixte bleu de thymol-bleu de bromothymol vire au jaune lorsqu'il se forme de l'acide, même dans ce milieu fortement alcalin.
Le pH alcalin du milieu améliore la récupération de V.cholerae.
Ⅳ. Résultats
| Organismes | Croissance |
|---|---|
| V. cholerae | Grandes colonies jaunes. |
| V. parahaemolyticus | Colonies à centre bleu à vert. |
| V. alginolyticus | Grandes colonies jaunes. |
| Proteus/Entérocoques | Inhibition partielle. En cas de croissance, les colonies sont petites et jaunes à translucides. |
| Pseudomonas/Aeromonas | Inhibition partielle. Si la croissance, les colonies sont bleues. |
Vibrio parahaemolyticus sur TCBS