Ⅰ. Généralités
La gélose Salmonella-Shigella ou gélose SS est un milieu sélectif et différentiel pour l'isolement des bacilles
entériques pathogènes, en particulier Salmonella et Shigella, à partir de selles, d'aliments et de matériel clinique.
🏾 Le principe de l'agar est basé :
- Sur l'utilisation de sel biliaire, le citrate de sodium et le vert brillant pour l'inhibition des bactéries gram-positives.
- Sur a fermentation de lactose et la production de sulfure d'hydrogène (H2S) pour la différenciation des organismes
Gélose Salmonella Shigella (source : @diplococologia)
◈ La gélose Salmonella Shigella est une modification de la gélose désoxycholate-citrate décrite par
Einar Leifson en 1935.
Ⅱ. Préparation / Composition
Suspendre les composants, poudre déshydratée, dans l'eau (63 grammes dans 1000 ml d'eau purifiée/distillée). Faire bouillir en agitant fréquemment pour dissoudre complètement le milieu.
Ne pas autoclaver ou surchauffer : Une surchauffe peut détruire la sélectivité du milieu.
Refroidir à 50°C et verser dans des boîtes de Pétri.
Composition gélose SS |
| Ingrédients |
gramme/litre |
Ingrédients |
gramme/litre |
| Digestion pancréatique de caséine |
2.5g |
Digestion peptique de tissus animaux |
2.5g |
| Extrait de boeuf |
5g |
Lactose |
10,0g |
| Thiosulfate de sodium |
8.5g |
Citrate de sodium |
8.5g |
| Sels biliaires |
8.5g |
Citrate d'ammonium ferrique |
1.0 g |
| Vert Brillant |
0.00033g |
Rouge neutre |
0,025g |
| Gélose |
15,0g |
pH final |
7,0 ± 0,2 |
Ⅲ. Principe de la gélose Salmonella-Shigella (SS)
◈ Sélectivité : La sélectivité de ce milieu repose sur la présence de vert brillant, citrate de sodium et de sels biliaires qui inhibent totalement la croissance des bactéries Gram positives et inhibent partiellement la croissance des Enterobacteriaceae et Proteus.
◈ Différenciation : La différenciation, dans le milieu SS, des organismes entériques est réalisée par :
- L'incorporation de lactose dans le milieu. Les organismes qui fermentent le lactose produisent de l'acide qui, en présence de l'indicateur rouge neutre, entraîne la formation de colonies rouges. Les non-fermenteurs de lactose forment des colonies incolores
- Une différenciation supplémentaire reposant sur la production d’hydrogène sulfuré (H2S) est possible grâce à la présence de thiosulfate de sodium et de citrate de fer. Elle se traduit par des colonies noir ou à centre noir.
Salmonella sur gélose SS (source : @microbzoo)
Salmonella et Shigella sur gélose SS (source :@micro-lab )
Note :
- La gélose SS peut inhiber certaines espèces de Shigella telles que S. sonnei et S. dysenteriae
- Les fermenteurs tardifs du lactose peuvent nécessiter 48 heures d'incubation pour se développer et produire une réaction colorée sur gélose SS
Ⅳ. Lecture / Interpretation
◈ Après 24 heures à 37°C en aérobiose, en général :
Les colonies lactose-négatives sont incolores. Les colonies lactose-positives sont roses à rouges. Les colonies produisant du H2S ont un centre noir..
| Organismes |
Croissance |
| Shigella spp. et Salmonella spp. non productrices de H2S. |
Colonie incolore |
| Salmonella spp. productrice de H2S. |
Colonies à grands centres noirs à périmètre clair |
| Klebsiella |
colonie rose à rouge avec ou sans zone de bile précipitée. |
| Proteus |
Colonies translucides, plus petites que Salmonella, à centre noir.
|
| Gram positif |
Partiellement ou totalement inhibée. |