Gélose Sabouraud
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Ⅰ. Introduction
Le milieu gélosé de Sabouraud est un milieu sélectif pour la culture fongique et principalement utilisé pour l'isolement des dermatophytes, des levures et de divers autres champignons pathogènes et non pathogènes.
Le milieu Sabouraud, développé par le dermatologue français Raymond J. A. Sabouraud en 1892 , est recommandé par la Pharmacopée européenne pour l'isolement et l'identification de Candida albicans à partir d'échantillons non stériles et pour la préparation et l'entretien de souches test fongiques.
La formule traditionnelle repose sur un pH bas (5,6) pour inhiber la croissance bactérienne. Cependant, l'ajout d'antibiotiques au milieu acide pour inhiber les bactéries est courant dans les versions actuellement utilisées. De plus, La concentration élevée en glucose offre un avantage pour la croissance des champignons (osmotiquement stables) alors que la plupart des bactéries ne tolèrent pas la concentration élevée en sucre.
Gélose Sabouraud
Note : Le maltose dans la formule originale est aujourd'hui moins utilisé que le glucose (dextrose) de sorte que le milieu est communément appelé « gélose au dextrose de Sabouraud ».
Ⅱ. Composition gélose Sabouraud
Suspendre 65,0 grammes dans 1000 ml d'eau purifiée/distillée. Porter à ébullition pour dissoudre complètement le milieu. Stériliser par autoclavage à une pression de 15 livres (121°C) pendant 15 minutes. Refroidir à 45-50°C. Bien mélanger et verser dans des boîtes de Petri stériles.
Composition gélose Sabouraud |
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|---|---|---|---|
| Ingredients | gram/litre | Ingredients | gram/litre |
| Digestion peptique de tissus animaux | 5.0g | Digestion pancréatique de caséine | 5.0g |
| Dextrose | 40.0 g/L | Gélose | 15.0g |
Ⅲ. Différents types de gélose Sabouraud
🏾 Gélose Sabouraud avec antibiotiques
Les antibiotiques couramment utilisés sont la gentamicine, qui inhibe les bactéries gram-négatives, et/ou le chloramphénicol, qui inhibe une large gamme de gram-positifs et de gram-négatifs, et le cycloheximide, qui inhibe principalement les champignons saprophytes mais pas les dermatophytes ou les levures.
- Le chloramphénicol peut avoir un effet inhibiteur sur plusieurs champignons pathogènes.
- La pénicilline, la gentamicine et la streptomycine, ou une combinaison de celles-ci, se sont avérées efficaces pour inhiber les bactéries sans affecter la croissance fongique
Les antibiotiques ne doivent être ajoutés qu'après que le milieu a été autoclavé puis refroidi à environ 45 à 50 °C.
🏾 Gélose Sabouraud avec bleu de méthyle
La gélose Sabouraud au bleu de méthyle contient 0,01 % de bleu de méthyle en complément de la gélose Sabouraud. Ce milieu a été rapporté pour faire la distinction entre C. albicans et C. dubliniensis sur la base de la fluorescence jaune de C. albicans sous une lampe Woods
🏾 Gélose Sabouraud d'Emmons
En 1977, Emmons a formulé une version alternative de la gélose de Sabouraud, il a modifié la formule en ajustant le pH et en réduisant la concentration de dextrose. Ce pH neutre favorise la récupération de certains champignons pathogènes.
🏾 Bouillon Sabouraud
La même composition mais sans gélose.
Ⅳ. Résultats
Les levures développent des colonies crémeuses à blanches. Les moisissures se développeront sous forme de colonies filamenteuses de différentes couleurs. Comptez le nombre de colonies et tenez compte du facteur de dilution (si l'échantillon à tester a été dilué) pour déterminer le nombre de levures et/ou de moisissures par gramme ou millilitre de matière.
Candida auris sur gélose Sabouraud (source :@in_petri)
Aspergillus niger sur gélose Sabouraud (source :@smallbutcool)
Reference
- F. C. ODDS - Sabouraud('s) agar
- neogen - Sabouraud Dextrose Agar
- Liofilchem - Sabouraud Dextrose Agar
- HUMEAU - Sabouraud Dextrose Agar
- HIMEDIA - Sabouraud Dextrose Agar
- thermofisher - Simmons Citrate Agar (Dehydrated)
- BD - Sabouraud Glucose Agarl
- ASM - Sabouraud Agar for Fungal Growth Protocols
- Handbook of MICROBIOLOGICAL MEDIA Fourth Edition
- Manual of Commercial Methods in Clinical Microbiology 2ed