M.E.V.A.G

- Les bactéries peuvent utiliser les glucides par deux voies métaboliques différentes :

- Une voie Fermentative dans laquelle toutes les réactions peuvent avoir lieu en l’absence de l’oxygène de l’air ; il se forme des catabolites de dégradation en particulier acides, qui s’accumulent d

- Une voie Oxydative dans laquelle l’oxygène de l’air est obligatoirement utilisé, et peu de catabolites acides sont formés. La recherche d’une acidité apparue par oxydation d’un glucide doit donc être faite dans un milieu peu tamponné, tel que le milieu MEVAG.

☰ Le milieu MEVAG peut être utilisé à deux fins :

  • - Détermination de la Voie d’Attaque du Glucose,
  • - Etude des Glucides attaqués par les bactéries oxydatives.
MEVAG

ATTENTION : ajout de glucose stérile à 1 % avant l’ensemencement

Principe de milieu M.E.V.A.G


- Pour étudier la voie d’attaque d’un glucide, on utilise des milieux contenant un seul glucide et un indicateur de pH.

- la présence du glucose comme seul glucide et du BBT comme indicateur de pH. L’utilisation du glucose se traduit par une acidification du milieu révélée par le virage du bleu de bromothymol à sa teinte acide (jaune).

- l’étape de régénération qui permet de créer un gradient de dioxygène.

Technique d’ensemencement


  1. Régénérer le tube 20 minutes à 100°C
  2. Additionner stérilement le glucose pour une concentration finale de 1%
  3. Solidifier le milieu en le plaçant dans un bain d’eau froide
  4. Ensemencer par une piqûre centrale à l’aide du fil droit.
  5. Incuber 24h à 37°C, bouchon dévissé.

Lecture et Interprétation M.E.V.A.G


M.E.V.A.G

- Tube 1 : peu ou pas de culture (pas d’utilisation du glucose) absence d’acidification : Métabolisme inerte.

- Tube 2 :pour le tube avec paraffine il y a peu ou pas de culture et une absence d’acidification. Dans le tube sans paraffine, il y a une acidification modéré, généralement le haut du tube est jaune et le reste est vert : Métabolisme oxydatif.

- Tube 3 :les deux tubes sont jaunes, acidification dans les deux tubes : Métabolisme fermentatif et oxydatif du glucose.

- Tube 4 : acidification dans le tube avec paraffine seulement : Métabolisme fermentatif seul.

- Tube 5 :le haut du tube est bleu, bactéries inertes au glucose : utilisation des peptides comme source d'énergie