Milieu de Hugh Leifson (M.E.V.A.G.) : Utilisation et Interprétation
Le milieu de Hugh Leifson (M.E.V.A.G.) est un milieu de culture utilisé pour étudier le métabolisme des glucides chez les bactéries. Il permet de déterminer si les bactéries utilisent le glucose par voie fermentative, oxydative, ou les deux. Ce milieu est particulièrement utile pour différencier les bactéries en fonction de leur capacité à métaboliser les glucides en présence ou en absence d'oxygène.
◉ Principes du milieu M.E.V.A.G.
Le milieu M.E.V.A.G. contient :
- Le glucose comme seule source de glucides.
- Le Bleu de Bromothymol (BTB) comme indicateur de pH.
- Un gradient d'oxygène créé par la régénération du milieu.
Fonctionnement :
- Fermentation : En absence d'oxygène, les bactéries produisent des acides, ce qui acidifie le milieu et fait virer le BTB au jaune.
- Oxydation : En présence d'oxygène, les bactéries produisent moins d'acides, et le milieu reste vert ou devient bleu en surface (alcalinisation due à l'utilisation des peptides).
◉ Technique d'ensemencement
- Régénérer le tube : Chauffer le tube pendant 20 minutes à 100°C pour créer un gradient d'oxygène.
- Ajouter le glucose : Ajouter aseptiquement du glucose pour obtenir une concentration finale de 1%.
- Solidifier le milieu : Refroidir le tube dans un bain d'eau froide.
- Ensemencer : Effectuer un ensemencement par piqûre centrale avec une aiguille droite.
- Incuber : Incuber à 37°C pendant 24 heures avec le bouchon desserré.
◉ Lecture et interprétation des résultats
| Tube | Observation | Interprétation |
|---|---|---|
| Tube 1 | Peu ou pas de croissance, pas d'acidification | Métabolisme inerte (pas d'utilisation du glucose) |
| Tube 2 |
Avec paraffine : Peu ou pas de croissance, pas d'acidification. Sans paraffine : Acidification modérée (jaune en haut, vert en bas). |
Métabolisme oxydatif |
| Tube 3 | Acidification dans les deux tubes (jaune) | Métabolisme fermentatif et oxydatif |
| Tube 4 | Acidification uniquement dans le tube avec paraffine | Métabolisme uniquement fermentatif |
| Tube 5 | Le haut du tube est bleu | Bactérie inerte au glucose (utilisation des peptides comme source d'énergie) |
◉ Utilisations du milieu M.E.V.A.G.
- Détermination de la voie d'utilisation du glucose : Fermentation, oxydation, ou les deux.
- Étude des glucides utilisés par les bactéries oxydatives.
◉ Conclusion
Le milieu de Hugh Leifson (M.E.V.A.G.) est un outil essentiel pour étudier le métabolisme des glucides chez les bactéries. Son indicateur de pH et son gradient d'oxygène permettent de distinguer facilement les voies métaboliques fermentatives et oxydatives. L'utilisation d'un tableau Bootstrap rend les résultats plus accessibles et plus faciles à interpréter.