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Gélose Columbia | Principe | Composition | Lecture
Ⅰ. Introduction
Décrit à l'origine comme une base de gélose nutritive à usage général par Ellner en 1966 à l'Université de Columbia. Gélose Columbia est un milieu très nutritif permettant la culture et l’isolement d’une grande variété de microorganismes.
Depuis que les milieux déshydratés sont devenus disponibles, les 2 types de base de gélose au sang les plus fréquemment utilisés sont l'hydrolysat de caséine ou les milieux d'infusion de viande. La gélose Columbia combine les vertus de ces deux types de milieu pour donner une performance globale améliorée.
Par addition de sang, d’agents sélectifs ou d’accélérateurs de croissance, il est possible de préparer une grande diversité de milieux adaptés à des utilisations spécifiques.
Gélose Columbia
Ⅱ. Composition gélose Columbia
Suspendre les composants, poudre déshydratée, dans l'eau (42,5 grammes dans 1000 ml d'eau purifiée/distillée). Le milieu est bouilli pendant quelques secondes jusqu'à dissolution complète des ingrédients. Répartir dans des tubes ou flacons et stériliser par autoclavage à 121°C pendant 15 minutes.
Composition gélose Columbia |
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|---|---|---|---|
| Ingredients | gram/litre | Ingredients | gram/litre |
| Digestion pancréatique de caséine | 12g | Digestion peptique de tissu animal | 5.0g |
| Extrait de levure | 3.0g | Extrait de bœuf | 3g |
| Fécule de maïs | 1g | Chlorure de sodium | 5g |
| Gélose | 13.5g | pH final | 7,3 ± 0,2 |
Ⅲ. Préparation à partir de la base de gélose Columbia
🏼 Avec la base Columbia, il est possible de préparer les milieux suivants :
- Préparation de la gélose au sang : à 45°C, mélanger de manière homogène 5 à 10 % de sang défibriné stérile, après agitation, en évitant d'inclure des bulles d'air, répartir en boîtes de Petri. il permet de déterminer les réactions hémolytiques.
- Préparation de la gélose au sang cuit (chocolat) : Ajouter 5% de sang stérile. Chauffer le mélange au bain-marie environ 10 minutes à 80 °C en agitant tout le temps jusqu'à ce que le milieu devienne brun chocolat, répartir en boîtes de Petri.
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Préparation milieu Blaser–Wang Campylobacter : Gélose Columbia (890mL) +
Sang de mouton (100mL) + Supplément antibiotique 10ml(Céphalothine, Vancomycine, Triméthoprime, Amphotéricine B, Polymyxine B).
Note : De la mème manière : Milieu Campylobacter de Karmali et Milieu Campylobacter de Butzler. - La base de gélose Columbia peut être utilisée pour préparer de la gélose lactosée au lait et à l'émulsion de jaunes d'oeufs pour l'isolement des clostridies exigeantes
- Milieu sélectif de Gardnerella vaginalis et Milieu pour Haemophilus ducreyi.
🏼 Autres applications :
- Test de CAMP
- Test de Nagler
- Test Elek
Hémolyse alpha
Hémolyse bêta
CAMP TEST