🏾 Introduction
La phosphatidylcholine, communément appelée lécithine, est un phospholipide largement distribué dans les tissus animaux, le jaune d'œuf et certaines plantes supérieures. Certains microorganismes produisent de la lécithinase (aussi appelée phospholipase C), une enzyme qui hydrolyse la lécithine en diglycérides et phosphocholine.
L'activité lécithinasique est une caractéristique biochimique clé utilisée pour identifier et différencier diverses bactéries Gram-positives et Gram-négatives, notamment des espèces pathogènes comme Clostridium perfringens, Staphylococcus aureus et Listeria monocytogenes.
🏾 Principe
La gélose au jaune d'œuf est un milieu enrichi et différentiel utilisé pour détecter l'activité lécithinasique. La lécithine, composant majeur du jaune d'œuf, est dégradée par les bactéries productrices de lécithinase en diglycérides insolubles et phosphocholine. Cette réaction forme un précipité blanc opaque autour des colonies bactériennes, indiquant un test positif à la lécithinase.
🏾 Composition du milieu
Gélose au jaune d'œuf :
| Composant | Quantité |
|---|---|
| Digestion pancréatique de caséine | 15,0 g |
| Digestion papaïque de farine de soja | 5,0 g |
| Chlorure de sodium | 5,0 g |
| Extrait de levure | 5,0 g |
| L-Cystine | 0,4 g |
| Hémine | 5,0 mg |
| Vitamine K1 | 10,0 mg |
| Émulsion de jaune d'œuf | 100,0 mL |
| Agar | 20,0 g |
pH final : 7,0 ± 0,3 à 25°C.
🏾 Protocole du test à la lécithinase
1. Inoculation : Étaler une colonie isolée de l'organisme à tester en ligne droite sur la gélose au jaune d'œuf.
2. Conditions d'incubation :
- Bactéries aérobies : Incuber à 35–37°C pendant 24–48 heures.
- Bactéries anaérobies : Incuber en jarre anaérobie à 35–37°C pendant 24–48 heures.
3. Observation : Examiner la plaque pour détecter un halo opalescent autour des colonies.
🏾 Résultats et interprétation
- Test positif : Apparition d'une zone blanche opaque s'étendant dans le milieu autour de la colonie.
- Test négatif : Absence de zone opaque.
🏾 Applications du test à la lécithinase
- Études de pathogénicité : Les lécithinases contribuent à la virulence en perturbant les membranes cellulaires de l'hôte.
- Identification bactérienne :
- Clostridium perfringens (double zone d'hémolyse + activité lécithinasique).
- Staphylococcus aureus (corrélation entre lécithinase et production de coagulase).
- Pseudomonas aeruginosa et Listeria monocytogenes.
- Différenciation des espèces du genre Bacillus.
