La phosphatidylcholine ou simplement la lécithine est une substance largement répandue dans les tissus animaux, le jaune d'œuf et certaines plantes supérieures, consistant en phospholipides liés à la choline.

Certains micro-organismes possèdent de la lécithinase, également appelée phospholipase C, qui est une enzyme qui sépare la lécithine phospholipidique. Une telle activité de lécithinase est utilisée pour caractériser plusieurs bactéries à Gram positif et à Gram négatif.

Principe :

La gélose au jaune d'œuf est un milieu enrichi et différentiel utilisé pour l'isolement et la différenciation présumée de différentes espèces sur la base de leur activité lécithinase.

La lécithine est un composant normal du jaune d'oeuf. Ensemencés sur une gélose au jaune d'œuf, les microorganismes qui possèdent une lécithinase décomposent la lécithine en diglycéride insoluble et en phosphorylcholine, ce qui entraîne la formation d'un précipité dans le milieu. Ainsi, une zone de précipitation blanche et opaque s'étendant au-delà des limites de la colonie indique une activité positive de la lécithinase du micro-organisme testé.

Milieu :

Gélose au jaune d'oeuf

    - Digestion pancréatique de caséine....15,0 g,
    - vitamine K1 .........................10,0 g, 
    - chlorure de sodium ...................5,0 g, 
    - digestion papa de farine de soja .....5,0 g, 
    - extrait de levure ....................5,0 g, 
    - L-cystine ............................0,4 g, 
    - Hemin ................................5,0 g, 
    - émulsion de jaune d'oeuf ..........100,0 ml, 
    - agar ................................20,0 g.

pH final 7,0 +/- 0,3 à 25 ° C.

Procédure :

• -Prenez une colonie de la souche à tester et ensemencez-la en ligne droite sur la gélose.
• - Pour les bactéries aérobies, incubezla plaque à une température de 35 à 37 ° C pendant 24 à 48 heures.
• - Pour les bactéries anaérobies, incubez de manière anaérobie dans un pot à gaz immédiatement après la formation de traînées et transférer dans l'incubateur maintenu à une température de 35 à 37 ° C pendant 24 à 48 heures.
• - Examinez la plaque à la recherche du halo opalescent entourant la culture.

Résultats:

Test positif : Apparition d'une zone blanche, opaque et diffuse qui s'étend dans le milieu entourant les colonies.

Test négatif : absence de zone blanche opaque s'étendant à partir du bord de la colonie.

Usages:

-Les lécithinases bactériennes présentent un intérêt particulier en raison :

• • du rôle possible de ces enzymes dans la pathogénicité.
• • de son utilité dans l'identification de Clostridium perfringens, Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa ou Listeria monocytogenes.

-L’activité de la lécithinase de S. aureus est utilisée dans la détection des souches à coagulase positive, en raison du lien élevé qui existe entre l’activité de la lécithinase et l’activité de la coagulase.

-Peut être utilisé pour différencier certaines espèces du genre Bacillus.

Limites:

• -Il est recommandé d'effectuer des tests biochimiques, immunologiques, de spectrométrie de masse ou de spectrométrie de masse sur des colonies de culture pure pour une identification complète.
• -Le maintien de la condition anaérobie est obligatoire.
• - Un test de lécithinase négatif doit être comparé à une plaque de contrôle non inoculée, car la lécithinase peut diffuser à travers toute la plaque de gélose et rendre l'interprétation difficile.