Test de Hodge Modifié : Procédure et Interprétation

Le test de Hodge modifié est une méthode simple et efficace pour détecter les entérobactéries productrices de carbapénémases (EPC). Il est utilisé en routine pour identifier les souches présentant une sensibilité diminuée (intermédiaire ou résistante) aux carbapénèmes.

Indications du Test

• Objectif : Détecter la production de carbapénémases par des entérobactéries.
• Souches concernées : Toute souche présentant une sensibilité diminuée (I/R) à au moins un carbapénème doit être considérée comme suspecte d’EPC.

Procédure

Matériel nécessaire

• Souche témoin : Escherichia coli ATCC 25922.
• Disques d’antibiotiques : Méropénème (10 µg) ou ertapénème (10 µg).
• Gélose Mueller Hinton.
• Bouillon ou solution saline stérile.

Étapes

• Préparer une suspension de E. coli ATCC 25922 à une densité de 0,5 McFarland dans 5 ml de bouillon ou de solution saline.
• Diluer la suspension à 1:10.
• Ensemencer la dilution sur une gélose Mueller Hinton, comme pour un antibiogramme standard.
• Placer un disque de méropénème (10 µg) ou ertapénème (10 µg) au centre de la boîte de Petri.
• Ensemencer la souche test en une ligne droite du bord du disque au bord de la plaque.
• Répéter avec une souche témoin positive (productrice de carbapénémase) et une souche témoin négative (non productrice).
• Incuber la plaque à 35 ± 2 °C en air ambiant pendant 16 à 24 heures.

Interpréter

Test Positif

• Observation : Une déformation ou un clivage de la zone d’inhibition autour du disque de carbapénème, formant une forme en clé de voûte (ou "cloverleaf").
• Signification : La souche test produit des carbapénémases, qui hydrolysent le carbapénème et permettent à E. coli ATCC 25922 de pousser dans la zone d’inhibition.

Test Positif

• Observation : Aucune déformation de la zone d’inhibition. La croissance de E. coli ATCC 25922 est uniformément inhibée autour du disque.
• Signification : La souche test ne produit pas de carbapénémases.

Limites du Test

• Le test de Hodge modifié peut donner des faux négatifs avec certaines carbapénémases (ex : OXA-48).
• Il ne permet pas de différencier les types de carbapénémases.
• Les souches productrices de bêta-lactamases à spectre étendu (BLSE) ou de céphalosporinases peuvent parfois donner des résultats faussement positifs.