Contenu :
Gélose Brucella | Principe | Préparation | Interpretation
Ⅰ. Généralités
La gélose Brucella est un milieu de culture enrichi et non sélectif, idéal pour cultiver des bactéries exigeantes comme Brucella spp. ou Campylobacter spp. Grâce à sa composition riche et la possibilité d’y ajouter du sang, elle permet aussi d’étudier les réactions hémolytiques des bactéries. Découvrez son fonctionnement, sa préparation et ses applications en laboratoire.
Gélose Brucella
Ⅱ. Préparation / Composition
Suspendre les composants, poudre déshydratée, dans l'eau (43g dans 1000 ml d'eau purifiée/distillée). Porter à ébullition et dissoudre complètement le milieu et stériliser en autoclave à 121°C pendant 15 minutes.
Refroidir le milieu à 45°-50,0°C et ajouter aseptiquement 5 % de sang rouge de mouton ou 10 % de sang de cheval. Répartir dans
des boîtes de Petri stériles.
| Ingrédient | Quantité (par litre) |
|---|---|
| Digestion enzymatique de caséine | 10,0 g |
| Digestion enzymatique de tissus animaux | 10,0 g |
| Extrait de levure | 2,0 g |
| Chlorure de sodium | 5,0 g |
| Dextrose | 1,0 g |
| Bisulfite de sodium | 0,1 g |
| Gélose | 15,0 g |
Ⅲ. Principe et Interpretation
Ce milieu favorise la croissance de micro-organismes exigeants grâce à sa teneur en peptones, glucose, extrait de levure et sang. Les peptones fournissent de l'azote organique. L'extrait de levure est une puissante source de vitamines B. Le glucose est utilisé comme source d'énergie. Le sang de cheval fournit à la fois les facteurs X et V qui sont nécessaires à la croissance de certains organismes ; par exemple. Haemophilus influenzae.
La croissance de la flore microbienne qui l'accompagne peut être supprimée par l'ajout de bacitracine, de polymyxine, de cycloheximide et éventuellement de violet d'éthyle.
les réactions hémolytiques dépendent du type de sang ajouté
- les entérocoques qui n'hémolysent que très rarement le sang de mouton, vont produire une bêta-hémolyse bien visible sur le sang de cheval.
- Staphylococcus aureus qui est généralement bêta-hémolytique sur le sang de mouton, sera souvent non hémolytique sur le sang de cheval.
Les différentes espèces de Brucella peuvent être différenciées par leur sensibilité différente aux colorants thionine et fuchsine.
Ⅳ. Limitations
- Non sélective : Nécessite parfois des additifs pour inhiber les contaminants.
- Interprétation délicate : Les réactions hémolytiques varient selon le type de sang utilisé.
Ⅴ. Conclusion
La gélose Brucella est un milieu incontournable pour cultiver des bactéries exigeantes ou étudier leurs propriétés hémolytiques. Sa polyvalence en fait un outil précieux en laboratoire, à condition de maîtriser ses subtilités d’interprétation.