Gélose BEA | Principe | Préparation | Interpretation
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Ⅰ. Généralités
La gélose bile esculine, gélose BEA est un milieu sélectif et différentiel. Ce milieu teste la capacité des organismes à hydrolyser l'esculine en présence de bile. Il est couramment utilisé pour identifier les membres du genre streptocoques du groupe D et des entérocoques.
Le milieu BEA contient de la bile pour inhiber la croissance des bactéries gram-positives ainsi que de nombreuses bactéries gram-négatives, et de l'esculine qui est le composant différentiel.
Dans certaines préparations, le milieu peut contenir de l'azide de sodium (augmente la sélectivité)
Gélose BEA
Ⅱ. Préparation / Composition
Suspendre les composants, poudre déshydratée, dans l'eau (64g dans 1000 ml d'eau purifiée/distillée).
Porter le milieu à ébullition sous
agitation constante pendant au moins 1 minute.
Stériliser à l'autoclave à 121°C pendant 15 minutes, refroidir à 45-50°C.
Composition gélose BEA |
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|---|---|---|---|
| Ingrédients | Gramme/litre | ||
| Extrait de bœuf | 11g | ||
| Digestion enzymatique de gélatine | 34,5 g/L | ||
| Esculine | 1g | ||
| Sulfate de manganèse | 0.05g | ||
| Bile de boeuf | 2g | ||
| Citrate d'ammonium ferrique | 0,5 g/L | ||
| Gélose | 15,0 g/L | ||
◈ Note : le milieu peut contenir de l'azide de sodium qui augmente la sélectivité, mais l'azoture de sodium est extrêmement dangereux.
Ⅲ. Principe de la gélose BEA
◈ La peptone de gélatine et l'extrait de bœuf apportent les éléments essentiels nécessaires à la croissance.
◈ La différenciation : Si un organisme peut hydrolyser l'esculine en présence de bile, le produit esculétine est formé. L'esculétine réagit avec le citrate ferrique (dans le milieu), formant un complexe de fer phénolique qui transforme le milieu du brun foncé au noir.
◈ La sélectivité : La sélectivité est obtenue par l'ajout de bile (oxgall), qui inhibe la croissance de la plupart des cocci à Gram positif autres que les streptocoques du groupe D et des entérocoques .
Ⅳ. Lecture / Interpretation
◈ Examiner après 18 à 24 heures pour les colonies positives à l'esculinase. Attendez jusqu'à 72 heures avant de signaler en tant que négatif.
| Organismes | Croissance |
|---|---|
| Enterococcus | Bonne croissance. Hydrolyse de l'esculine positive entraînant un noircissement du milieu autour de la croissance. |
| Escherichia coli | Bonne croissance. Pas de noircissement des milieux autour des colonies |
| Streptococcus pyogenes | Pas de croissance |
Références:
- uwyo - BILE ESCULIN AGAR
- Handbook of Culture Media for Food Microbiology
- BD - Bile Esculin Agar Slants
- Color Atlas of Medical Bacteriology
- Thermo Scientific™ - BEA AGAR
- neogen - BEA AGAR
- DALYNN - BILE ESCULIN AGAR