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Gélose BEA : Du Principe à l'Interprétation
◉ Généralités
La gélose BEA (Bile Esculin Agar) est un milieu de culture sélectif et différentiel largement utilisé en microbiologie clinique pour l'identification des entérocoques et des streptocoques du groupe D. Son principe repose sur la capacité de ces micro-organismes à hydrolyser l'esculine en présence de bile, une caractéristique distinctive qui permet de les différencier des autres bactéries. Cet article explore en détail le principe, la préparation, l'utilisation et l'interprétation des résultats de la gélose BEA.
Enterococcus faecalis sur BEA
◉ Le Principe de la Gélose BEA
La gélose BEA repose sur une réaction chimique simple mais ingénieuse. Elle contient de l'esculine, un composé qui, lorsqu'il est hydrolysé par certaines bactéries, produit de l'esculetin. Ce dernier réagit avec le citrate ferrique pour former un complexe brun foncé à noir. Cette réaction est un indicateur clé : si le milieu noircit, c'est que la bactérie testée est capable d'hydrolyser l'esculine.
Mais ce n'est pas tout ! La gélose BEA contient également de la bile, un agent sélectif qui inhibe la croissance de nombreuses bactéries, sauf celles qui nous intéressent : les entérocoques et les streptocoques du groupe D.
◉ Composition de la Gélose BEA
La gélose BEA contient les ingrédients suivants par litre de milieu :
- Extrait de bœuf : 11 g (source de nutriments)
- Digestion enzymatique de gélatine : 34,5 g (source de carbone et d'azote)
- Esculine : 1 g (composant différentiel)
- Sulfate de manganèse : 0,05 g
- Bile de bœuf : 2 g (agent sélectif)
- Citrate d'ammonium ferrique : 0,5 g (pour la réaction colorimétrique)
- Gélose : 15 g (agent gélifiant)
◉ Préparation de la Gélose BEA
- Suspension : Dissoudre 64 g de poudre déshydratée dans 1000 ml d'eau distillée.
- Ébullition : Porter à ébullition sous agitation constante pendant au moins 1 minute pour assurer une dissolution complète.
- Stérilisation : Autoclave à 121°C pendant 15 minutes.
- Refroidissement : Refroidir à 45-50°C avant de couler en boîtes de Petri ou en tubes
◉ Utilisation de la Gélose BEA
- Inoculation : Ensemencer une colonie pure sur la surface de la gélose.
- Incubation : Incuber à 35-37°C pendant 18 à 24 heures en atmosphère aérobie.
- Observation : Examiner la croissance bactérienne et la coloration du milieu
◉ Interpréter les Résultats
| Résultat | Observation | Exemples de Bactéries |
|---|---|---|
| Positif | Noircissement du milieu autour des colonies, indiquant l'hydrolyse de l'esculine. | Enterococcus faecalis, Enterococcus faecium |
| Négatif | Absence de noircissement, malgré une croissance possible. | Escherichia coli |
| Pas de croissance | Inhibition complète de la croissance bactérienne. | Streptococcus pyogenes |
◉ Les Limites de la Gélose BEA
Comme tout outil, la gélose BEA a ses limites :
- Elle ne doit pas être utilisée seule pour un diagnostic définitif.
- Certaines bactéries, comme Listeria, peuvent donner des faux positifs.
- Elle nécessite une culture pure pour des résultats fiables.
◉ Conclusion
La gélose BEA est un allié précieux pour les microbiologistes. Grâce à sa simplicité et son efficacité, elle permet d'identifier rapidement des bactéries importantes en clinique ou dans l'industrie alimentaire. Cependant, comme toujours en science, il est essentiel de l'utiliser avec soin et de confirmer les résultats par d'autres tests.