Gélose Cled | Principe | Interprétation

Ⅰ. Introduction

La gélose Cled (Cystine Lactose Electrolyte Deficient ) est un milieu de culture différentielle, non inhibiteur, utilisée pour l’isolement, la numération et la différenciation des micro-organismes urinaires. Il favorise la croissance des agents pathogènes urinaires, mais empêche l'essaimage excessif des espèces de Proteus en raison de son manque d'électrolytes.

Le milieu permet une détermination quantitative des pathogènes urinaires dont Proteus lorsque des anses calibrées sont utilisées pour l'inoculation.

 gélose Cled

Ⅱ. Préparation / Composition

Suspendre les composants, poudre déshydratée, dans l'eau (36.13 grammes dans 1000 ml d'eau purifiée/distillée). Le milieu est bouilli pendant quelques secondes jusqu'à dissolution complète des ingrédients. Mélangez correctement et enfin stérilisez par autoclavage à 121 ° C pendant 15 minutes.

Refroidir à 50-55°C et répartir de manière aseptique dans des boîtes de Pétri stériles. Datez le milieu et attribuez-lui un numéro de lot.


Ⅲ. Gélose Cled: Principe

◈ Initialement décrit par G.H. Sandys en 1960, le milieu contient de la cystine, du lactose, du bleu de bromothymol et est déficient en électrolytes.

  • La cystine est ajoutée au profit des organismes qui ont un besoin spécifique en cystine. Elle favorise la croissance des coliformes.
  • Le lactose est inclus pour fournir une source d'énergie aux organismes capables de l'utiliser par un mécanisme de fermentation.
  • Le bleu de bromothymol est l'indicateur utilisé dans la gélose, il vire au jaune en cas de production d'acide lors de la fermentation du lactose ou vire au bleu foncé en cas d'alcalinisation. Les bactéries lactose-positives forment des colonies jaunes. Les bactéries qui décarboxylent la L-cystine provoquent une réaction alcaline et forment des colonies bleu foncé
  • La déficience en électrolytes réduit l’envahissement du milieu par les Proteus.

Ⅲ. Gélose Cled: Interprétation

Organismes Croissance
Escherichia coli, Citrobacte Colonies jaunes d'or, opaques, entourées d'un halo jaune
Enterobacter, Klebsiella Colonies jaunes à bleu blanchâtre, souvent mucoïdes ; milieu jaunâtre
Proteus, Serratia Colonies transparentes, translucides, entourées d'un halo bleu
Pseudomonas Colonies vertes avec une surface mate typique et une périphérie rugueuse
Streptocoques Petites colonies opaques, jaune pâle
Staphylocoques Très petites colonies opaques, jaunes
Entérocoques Petites colonies jaunes d'environ 0,5 mm de diamètre

Gélose CLED ecoli
Gélose CLED pseudo
Gélose CLED serratia

Reference

  1. Sandys, G. H. - A New Method of Preventing Swarming of Proteus sp. with a Description of a New Medium suitable for Use in Routine Laboratory Practice
  2. NEOGEN - Cystine Lactose Electrolyte Deficient (CLED) Agar
  3. universe84a - CLED Agar
  4. BD- CLED Agar
  5. sigmaaldrich- CLED Agar
  6. ACUMEDIA- CLED Agar